微衛(wèi)星位點廣泛存在于人類基因組中，微衛(wèi)星不穩(wěn)定（MSI）具有腫瘤特異性，腫瘤細(xì)胞會因DNA錯配修復(fù)功能的缺失導(dǎo)致微衛(wèi)星不穩(wěn)定。微衛(wèi)星不穩(wěn)定（MSI）是一個有近30年歷史的腫瘤標(biāo)志物，可以用于輔助林奇綜合征診斷，是結(jié)直腸癌、胃癌的預(yù)后因子和術(shù)后5-FU化療療效的預(yù)測因子。近年來隨著免疫檢測點抑制劑應(yīng)用的越來越廣泛，尤其是帕博利珠單抗跨瘤種獲批治療MSI-H或者dMMR腫瘤后，微衛(wèi)星不穩(wěn)定（MSI）作為各個實體瘤預(yù)后和制定輔助治療方案的重要分子標(biāo)志物越來越受到關(guān)注。MSI-H型腫瘤每年新發(fā)病例可達(dá)30萬，這意味著每年會有大量的MSI-H腫瘤患者可在免疫治療中獲益，因此，準(zhǔn)確診斷患者的MMR/MSI狀態(tài)十分關(guān)鍵。
1、目前檢測MMR/MSI的方法主要有三種，免疫組織化學(xué)染色法（IHC）、PCR+毛細(xì)管電泳法和二代測序法。其中PCR+毛細(xì)管電泳法是當(dāng)前業(yè)界公認(rèn)的金標(biāo)準(zhǔn)方法。IHC和PCR+毛細(xì)管電泳法在臨床使用較為廣泛，且一致性較高，但只使用IHC一種檢測手段有較大幾率造成MMR/MSI狀態(tài)的誤診。因此，開展MSI-PCR+毛細(xì)管電泳法十分必要，臨床醫(yī)師及患者可以根據(jù)不同的檢測需求，選擇最佳的MSI檢測方式。
2、MSI-PCR+毛細(xì)管電泳法檢測位點的選擇非常重要，目前國內(nèi)《CSCO結(jié)直腸癌診療指南》（2020版）推薦的唯一檢測panal則是美國國家腫瘤研究所（NCI）公布的“2B3D”NCI Panel：包含BAT-25,BAT-26，D5S346，D17S250，D2S123。國內(nèi)多中心研究提示“2B3D”Panel在中國人群中敏感性高于單核苷酸的Panel。
3、本科室開展的MSI-PCR+毛細(xì)管電泳法通過多重?zé)晒釶CR技術(shù)擴增同一患者的正常組織和腫瘤組織的微衛(wèi)星等位基因，借助毛細(xì)管電壓儀分析擴增后的基因圖譜，判斷腫瘤組織的微衛(wèi)星狀態(tài)。擴增的六個微衛(wèi)星位點包括兩個單核苷酸重復(fù)單元位點（BAT-25,BAT-26）、三個雙核苷酸重復(fù)單元位點（D5S346，D17S250，D2S123）以及一個五核苷酸重復(fù)單元的內(nèi)參位點（Penta C）。根據(jù)微衛(wèi)星位點不穩(wěn)定的數(shù)量分為微衛(wèi)星高度不穩(wěn)定型（MSI-H）、微衛(wèi)星位點不穩(wěn)定型（MSI-L）和微衛(wèi)星穩(wěn)定型（MSS）三種微衛(wèi)星狀態(tài)。此方法在準(zhǔn)確性，位點標(biāo)準(zhǔn)化，檢測結(jié)果不存在異質(zhì)性等方面具有極大優(yōu)勢。
微衛(wèi)星不穩(wěn)定（MSI）在指導(dǎo)實體瘤的免疫治療上具有十分重要的臨床意義，準(zhǔn)確的檢測MMR/MSI狀態(tài)至關(guān)重要，建議聯(lián)合PCR+毛細(xì)管電泳法和IHC法以獲得準(zhǔn)確可靠的MMR/MSI檢測結(jié)果，使得更多腫瘤患者獲益。
